[의약바이오 취업 캠프] - Day1

첫 번째 실습 날이 다가오고야 말았다.

 

<오늘의 교육>

1. OT 및 성폭력 교육

 

2. 실험기기 소개 - CO2 incubator(cell), water bath, sonicator, HPLC, 타정기, ELISA reader, 흡광도 찍는 기계, UV transilluminator 

 

3. 실험 기구 교육 - 현미경 사용하기/Pipet 사용하기(pipet aid, multi pipet)/scrapper 사용, 클린 벤치 사용하기(UV 확인, 모든 물건은 들어가기 전 소독, 뚜껑은 뒤집지 않는다.)

 

4. 부착세포 계대배양

세포 독성 실험 및 효능 시험을 위해 cell culture를 한다.

부착세포를 계대배양하는 방법은 1. Scrapper (Raw cell) 2. Trypsin-EDTA (HeLa cell)

세포 실험 전 배지는 water bath에서 워밍업 시키기

계대배양시 DMEM=배지, DPBS=washing buffer

 

<2조> 실습

배지 만들기 및 subculture (Raw 264.7 cell, #16, 1/5)

1. PS(항생제) 5ml를 DMEM 500ml에 넣어준다.

2. FBS(serum)를 invert 해주고 실린지로 10ml 빨아들인 후 필터를 끼워 배지 입구에 맞추고 주입한다. 이 과정을 5번 반복한다. 마지막은 실린지 피스톤을 뽑아서 필터를 끼우고 배지 입구에 맞춘 후, FBS를 부어서 주입한다.

3. labeling한다. (날짜, 조, 들어간 물질의 종류와 비율)

 

1. cell이 있는 dish를 기울여 media를 suction 한다. (발로 페달 밟으면 됨, yellow tip을 쓴다)

2. DPBS를 5-7ml 넣고 뚜껑에 닿지 않게 살살 흔들어준다.

3. DPBS suction 한다.

4. 새 dish에 배지를 8ml씩 넣어주고(x5), 원래 dish에 배지를 10ml 넣어준다.

5. 원래 dish를 scrapper로 긁어준다.

6. pipet으로 up down 시켜준다. (8ml 취하고 1ml씩 남기는 식으로)

7. 10ml 취해 새로운 배지에 2ml씩 넣어준다. (넣어줄 때 돌려주면서 골고루 넣어준다.)

8. 뚜껑에 labeling 한다.(종류, passage number, 날짜, 조)

9. dish들을 다시 CO2 incubator에 넣는다.

 

특이사항 - 프로젝트

원래 추출법 4g: 600(800)ml로 환류추출 – 농축을 하지 않아서 용질의 양을 늘려야 됨

 50g: 500ml로 환류추출로 변경

 

<소감>

얼마 안 되는 학부 인턴 경험 덕분인지 대부분의 수업과 실습을 무리 없이 소화했다.  하지만, 너무 집중해서 그런지 오후에 쉬는시간에 나도 모르게 잠들어 버렸다. 체력관리도 중요하니 밤에 잠을 일찍 자야겠다는 생각이 든다. 다행히 오늘은 나 자신에게 조금은 칭찬해줘도 될 만큼 성실했다고 생각한다. 앞으로도 성실히 나만의 역사를 만들어보고 싶다. 화이팅!