[의약바이오 취업 캠프] - Day2(1)

오늘은 두 번째 실습 날. 드디어 본색을 드러냈다.

<오늘의 교육>
1. 어제 Cell 배양한 거 현미경으로 확인 – 계대배양이 잘 되었다. 4-50% 정도 찬 것 같다.

2. <2조> 프로젝트 - 치자 추출(환류 추출)
조건 - 1) 분쇄한 치자 50g, 95% EtOH 500ml, 1시간 70℃
2) 분쇄한 치자 50g, D.W. 500ml, 1시간 100℃

방법
1. 환류 추출 볼에 믹서기로 분쇄한 치자와 용매를 각각 정량해서 넣는다.
2. 볼의 뚜껑을 덮고, 고정 후 온도계를 고정한다.
3. 환류추출 기계와 볼을 연결한 후, 기둥에 물을 흘려준다.
4. 온도를 설정하고, 기계를 작동시킨다. (온도가 잘 맞는지, 너무 끓지는 않는지 중간에 체크해야 된다.)

추출 후 필터링 – EtOH는 paper filter와 펌프를 이용해서 필터링
D.W. 는 원심분리 후 0.45γm syringe filter를 이용해서 필터링(*)

방법(EtOH 사용 추출물)
1. paper filter를 핀셋으로 집어 깔때기에 올리고, 살짝 적셔준다.
2. 펌프를 가동한다.
3. 추출물을 천천히 깔때기로 흘려준다.
4. 플라스크에 모인 결과물을 통 안에 넣고, labeling 후 냉장 보관한다.

방법(D.W. 사용 추출물)
1. 추출물을 15ml 튜브에 소분한다.
2. 600 rpm, 5분 원심분리한다.
3. 상층액을 새로운 튜브에 옮긴다.
4. 같은 조건으로 원심분리를 실시한다.
5. 상층액을 옮기고, syringe filter를 이용하여 거른다.(**)

특이사항 - 프로젝트
* D.W. 치자 추출물은 걸쭉해서 paper filter에 걸려서 안 내려갔기 때문에 이 방법을 선택했다.
** 장비의 한계로 원심분리를 했는데도 syringe filter가 막혔다. 교수님이 비커에 추출물을 다 옮기고 내일 중간에 맑은 층만 주사기로 뽑아서 필터링하자고 하셔서 일단 놔두고 왔다.

3. HPLC 교육 및 실습 - 아데닌과 카페인 분리하기
Day2(2)에 계속...