코끼리의 여행

1. 모의면접 면접 컨설팅을 해주시는 강사님께서 오셨다. 처음엔 15명의 교육생들이 각자 면접에 대해 가지고 있는 고민이나 질문들을 물어보면 그에 맞는 답을 해주시면서 대화를 나눴다. 이후엔 각 조별로 모의 면접을 봤다. 1조가 면접자, 2조가 면접관, 3조는 면접자를 평가하는 방식으로 돌아가면서 진행했다. 사실 약간 긴장을 했는데 다들 긴장한 티가 안 났다고 했다. 표정이 잘 드러나지 않아서 인상이 좀 안 좋게 보이거나 간절하지 않아 보일 수 있다고 생각했다. 이 부분은 스스로 영상을 찍어가면서 고쳐야겠다. 면접은 많이 보는 게 답이라는 말이 왜 그런지 알 수 있었던 시간이었다. 이번 기회로 남들과는 다른 나의 장점이 무엇인지, 그것을 어떻게 자연스럽게 어필할 수 있는지 고민할 수 있었다. 참 유익한 ..

오전까지는 평화로웠지만 지옥의 오후였다... 그 이유는 바로 3. MTT assay 결과 분석 흡광도 수치를 엑셀로 다운받아 정리하고 그래프를 그린다. 1) raw 데이터 정리 drug를 지표물질, 추출물 1, 추출물 2의 3종류로 처리를 했기에 각각의 흡광도를 엑셀로 다운받았다. 우선 첫 번째 칸(지표물질) 데이터를 정리하겠다. 2) blank 구하기 - DMSO만 넣어준 마지막 칸들의 흡광도 평균이 blank이다. 3) blank 빼주기 1. 수식을 걸어서 각각의 흡광도에서 blank를 빼준다. (F4키를 누르면 수식에서 blank를 고정시킬 수 있다.) 2. 1의 정리된 데이터에서 각 열의 평균과 표준편차를 수식을 걸어서 구해준다. 3. 2에서 구한 평균들을 드레그 해서 막대 그래프를 그려준다. 4..

6일차. 시작! 1. Cell seeding - 항염 효능 평가를 위한 cell seeding 항염 효능 평가는 LPS로 NO 생성을 유도한 후, drug를 처리해서 얼마나 NO 생성을 억제하는지 확인한다. 96 well plate에 지표물질과 천연물 2개를 각각 test한다. 목표 농도는 5x10^5 cell/well = 5x10^6 cell/ml이다 => M’ 사용할 양은 각 well 당 100㎕이고, 60개의 well을 사용하므로 6ml 필요하지만 넉넉하게 10ml로 잡았다. => V’ 현재 cell의 농도와 얼마를 사용할 지 정하기 위해 MV=M’V’식을 이용한다. 방법 자체는 MTT를 위한 cell seeding과 비슷하지만, 이번엔 cell 농도가 더 높다. 1. subculture한 세포를 ..

어느 덧 5일차 날씨도 제법 선선해졌다. 1. HPLC 결과 확인 - 어제 작동시킨 HPLC의 결과를 확인했다. 결과는 다음과 같다. 50분 이후부터는 기울기 비율을 초기 비율로 reset하고 안정화하는 구간이므로 특정 물질을 검출했다고 할 수 없다. 빨간색으로 표시된 부분이 target인 geniposide이다. 이 부분을 가지고 검정 곡선을 만들어 농도를 구했다. 추출물의 geniposide 농도를 구해보니 4.52%, 4.57%가 나왔다. 최소 2.9%는 나와야 정상이라고 하니 농도는 정상적으로 나온 셈이다. 하지만, 두 가지 문제가 있었다. 1. 피크가 너무 낮게 나왔다는 문제점이 있다. > standard의 농도를 높게 하고, 천연물을 기존에 1000배, 2000배에서 500, 250배로 조정한..

실습 2주차가 시작되었다. 1. HPLC - 2조 추출물 지표물질 함량 확인 다음의 조건으로 HPLC를 작동시켰다. 1. 전개액(1% acetic acid in D.W.과 1% acetic acid in ACN)을 만들어 sonication해서 준비한다. 2. standard인 geniposide sample을 x100, x200, x400배 희석해 10㎍/ml, 5㎍/ml 2.5㎍/ml으로 농도를 맞춘다. 3. 추출물 sample(D.W.와 에탄올 추출물)을 에탄올로 각각 x1000, x2000배 희석한다. 4. 2,3의 결과물들을 10㎕씩 HPLC vial에 옮겨준다. 5. HPLC 기기의 펌프 관을 닦고 1에서 만든 solvent로 교체한다.(선을 손으로 잡으면 안되고, 선이 solvent의 바닥에..