코끼리의 여행

5. NO assay 어제 cell treat로 LPS 처리를 한 cell이 생성한 NO의 양을 확인한다. Griess reagent 처리를 하고, ELISA reader로 흡광도를 측정한다. 방법 1. cell treat 했던 96 well plate의 각 well에서 상등액 100㎕씩을 새로운 96 well plate에 옮겨준다. 2. 96 well plate에 남은 칸에 배지를 100㎕ 씩 5칸 깔고, 맨 왼쪽에 Sodium nitrite 200uM 100㎕를 넣어주고 2-fold dilution 한다.(Standard curve로 사용한다.) 3. 옮긴 상등액과 Sodium nitrite가 들어간 칸에 griess agent 100㎕ 씩을 넣어 섞어준다. 4. ELISA Reader를 사용해 54..

드디어 금요일... 이번주의 마지막 날 시작! 1. 분광광도계(spectrophotometer) 기기실습 원리: 특정 물체는 빛이 물체에 부딪혔을 때 고유의 구조 때문에 특정 파장의 빛을 흡수하거나 투과한다. 분광광도계를 통해 물질 고유의 투과도와 흡광도를 알 수 있다. 더 나아가, Beer의 법칙으로 화합물 고유의 몰흡광계수와 흡광도의 관계를 통해 미지 시료의 농도도 구할 수 있다. 이때는 다른 농도를 가진 표준물질들로 검정곡선을 만들어 이용한다. 방법 1. 메틸오렌지, 브릴리언트 블루, 지표물질(geniposide)를 각각 D.W.에 1mg/ml로 희석해 sample을 준비한다. 2. 큐벳에 blank로 사용할 D.W.를 넣고 큐벳을 분광광도계에 넣은 후 작동시킨다. (빛이 통하는 투명한 옆면의 방향..